Процесс производства |
Аденозин Isopropylidine был преобразован к эстеру p-толуола sulphonyl (tosyl) реакцией с решением хлора tosyl, следовать методом Clark и др. (1951) [J. Chem. SOC. 2952]. Из-за своей тенденции к циклизации, реагент был использован сразу ему был готов. Склянка реакции с отделяя воронками была настроена в такой манере это вся система смогла быть эвакуирована и заполнена с чистым азотом 2 или три раза, для того чтобы исключить весь кислород, и реагенты смогли после этого быть добавлены желанный, в закрытой системе. Склянка содержала hydroxocobalamin mg 700,0 в 20 ml воды, одного гидридобората натрия mg воронки 200,0 в 10 ml воды, и другой незрелый эстер tosyl аденозина isopropylidine сделал из 500 аденозин isopropylidine mg растворил в 10 ml метанола 50% водного. На добавлении гидридобората к витамину, цвет изменил немедленно от красного цвета для того чтобы коричневеть, тогда медленно на зеленовато-черное. После минуты 15 был добавлен эстер tosyl аденозина isopropylidine, и цвет медленно изменил на краснокоричневое. После 45 минута на воздухе комнатной температуры была допущена и смесь была потрясена для того чтобы reoxidise любой остальной уменьшенный витамин B12. Щелочной раствор был нейтрализован с разбавляет хлористо-водородную кислоту и извлеченный с 3:1 четыреххлористого углерода фенола в небольших частях до водного слоя был почти бесцветна. Совмещенные выдержки были помыты с водой, смешанной с около 10 частями 10:1 carbontetrachloride-ацетона и потрясенный с небольшими частями воды до полностью красного цвета извлекл. Продукт был очищен хромотографией на столбцах целлюлозы DEAE (диэтилового aminoethyl) (3 x 1) следовать целлюлозой СМ (carboxymethyl) (6 x 1), превращенный с водой. Почти полностью цвет помытый быстро через целлюлозу DEAE. Выходящие и мыть были приложены к столбцу целлюлозы СМ, который более добавочно был начат с водой. Было продолжено вымывание покуда эта часть продолжаемая для того чтобы вытечь, в итоге 850 ml. Половин из этой части (425 ml) была сконцентрирована к немного ml при пониженном давлении; она выкристаллизовывала медленно после добавления ацетона к небольшой замутненности. Так cobamamide было получено. |